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聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点
聚丙烯酰胺凝胶是指由丙烯酰胺单体、作为交联剂的亚甲基双丙烯酰胺、四甲基乙二胺催化、自由基引发(光引发、化学引发等)聚合而成的交联聚丙烯酰胺。是化学合成的人工凝胶。
在以聚丙烯酰胺为支持矩阵的电泳程序中,一般来说,实现凝胶电泳有两种类型。
一种是单向电泳,即采用完整蛋白或经十二烷基LS钠(SDS)处理的蛋白单向迁移,在有凝胶的平板上平行分离(过去也用于玻璃管内圆柱棒凝胶电泳,现在很少使用)。
另一种是双向电泳, 先用蛋白质进行分离,然后用SDS处理凝胶板样品进行二方向分离。头一次分离出各种蛋白质,于是二方向分离出蛋白质亚基。
两种聚丙烯酰胺凝胶电泳都有通用的优点是:(1)合成聚合物,重复性好。⑵分离能力好。⑶凝胶的孔径大小可以通过增加或减少丙烯酰胺单体和交联剂(N,N’-亚甲基双丙烯酰胺)的浓度来调节。⑶操作简单,时间短。⑸化学性能稳定,力学性能好,柔软。(6)电泳可在酸性或碱性缓冲液中进行,等电点电泳可通过加入两性电解质进行,电泳可通过含有电解质表面活i性剂(SDS)或非电解质表面活i性剂(Np40、Tritonx-100等)的聚丙烯酰胺凝胶进行。
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