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核酸的聚丙烯酰胺凝胶电泳的步骤
发布时间:2021-04-07 浏览

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近来小编收到很多问题,其中一个就是下面小编为大家整理一下关于核酸的聚丙烯酰胺凝胶电泳的步骤的步骤,希望这些方法能够帮助到大家。
1、按照要求将长短两块玻璃板一边对齐,插入大约1.5cm宽的间隔片,板两侧及底部用1%的琼脂糖封边。
2、根据待分离DNA的大小配制适当浓度的聚丙烯酰胺凝胶,将装好的玻璃电泳板倾斜成45度到60度,将配好的凝胶缓缓倒入两玻璃板间的胶床中。
3、直至距离短玻璃板上缘约0.5cm时停止加胶,同时轻轻插入大小适合的梳子,小心取出梳子,立即用缓冲液冲洗加样孔,并用吸水纸把加样孔内的缓冲液吸干。
4、把胶固定于电泳槽上,加入1XTBE缓冲液,将DNA样品与适量的上样缓冲液混匀后,加到样品孔内。
5、接好电,电压设为1-8V/cm,进行电泳,当电泳结束后,切断电源,弃去电泳仪,取出胶床板,小心移去一块玻璃板。
6、让凝胶吸附在另一块玻璃板上,浸入含0.5微克的溴化乙锭溶液中,15-30min取出水洗,紫外仪下观察结果,在凝胶成像系统拍照。

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